有些外来化合物如以较小剂量输入机体，并不引起明显中毒症状，但如将此种小剂量反复多次输入机体，则一定时间后可出现明显中毒现象，称蓄积性毒性。检验一种外来化合物是否具有蓄积性毒性的试验即为蓄积毒性试验。进入机体的外来化合物经过代谢、转化和排泄，将由机体内消除。不同化合物消除过程所需的时间长短不同。当某些外来化合物多次反复输入机体时，如进入机体的化合物尚未完全消除，而下一次的受试物又继续进入，以致在机体内不断累积，总量不断增加。蓄积量超过最小作用量时，即呈现毒性作用，即蓄积性毒性。蓄积性毒性是慢性毒性作用的基础。蓄积毒性试验较常用的方法有：

(1) 蓄积系数试验法： 先用常规方法测定受试物的LD₅₀，然后取雌雄性大鼠各10～20只，第一次给予0.1LD₅₀剂量，共4d(天); 然后给予增加50 %的第二次剂量，接着每隔4d，剂量递增50%，持续进行。记录动物死亡数，至动物死亡积累到50 %死亡时，计算向动物输入受试物的累积总量，并按下式计算其蓄积系数，如蓄积系数<3，为强蓄积性;如≥3，则为弱蓄积性。

(2) 20天蓄积试验法： 成年大鼠(体重200g左右)，每组10只，雌雄分别同时进行，共五组。各组剂量分别为LD50的1/20、1/10、1/5、1/2，并另设溶剂对照组。每天灌胃一次，连续20d。各组累积总剂量分别可达1、2、4、10LD_50。然后观察7d，如1/20LD₅₀组已出现死亡，且各剂量组动物死亡情况呈剂量反应关系，则可认为受试物有较强蓄积作用;如1/20LD₅₀组未出现死亡，但以上各组呈剂量反应关系，表明有中等蓄积作用，如1/20LD₅₀未出现死亡，以上各组又无剂量反应关系，则可认为无明显蓄积作用。