某些环境毒物通过一定途径作用于机体，可刺激机体产生特异免疫性，当再次接触同样物质时，可出现敏感性增高的现象，称为致敏。具有致敏作用的物质称为致敏原(变应原)。在人类生活环境中有不少致敏原。致敏试验是为鉴定受试物是否具有致敏作用及其作用强度的试验，一般可采用动物实验法。

化学物质致敏作用的本质是一种病理性免疫反应 (变态反应)。生活环境中一般低分子量的化学物质，不具备完全抗原的性质，但有些具有半抗原性质，进入机体后，能与机体蛋白质分子发生共价结合，形成较稳定的大分子半抗原载体复合物，就具有完全抗原性质而引起特异性免疫反应。机体产生变态反应的过程可分三个阶段。①致敏阶段(感应阶段)。致敏原通过一定途径对机体初次作用; ②潜伏期阶段(反应阶段)。被致敏的机体需经一定潜伏期使机体对该物质产生特异免疫性 (特异抗体或致敏淋巴细胞)，并达到一定水平而处于超敏感状态。③激发阶段(效应阶段)。此时机体再次接触该物质时即出现特异的病理性免疫反应。因此，致敏试验也可按下列基本顺序进行： 首先对实验动物注射 (或皮肤涂擦及其他途径)致敏量的抗原(受试物)一次或多次;经过一定时间的潜伏期，一般较短，有时需3～4周或更长;然后作激发试验，即再次注射(或皮肤涂擦)一定量的抗原(受试物)，观察是否产生变态反应所特有的病理现象。

根据反应出现的速度，发病机理和特点，化学物质的变态反应可分为两类： 速发反应和迟发反应(见表1)。速发反应还可分过敏反应型、细胞溶解型及免疫复合物反应型。致敏原由呼吸道吸入的，常引起速发性变态反应;经皮肤进入体内的，则常引起迟发性变态反应。实验方法也可分为这两类。致敏试验的一般要求：

(1) 动物选择： 不同种属的动物对致敏原作用的反应差别甚大，豚鼠对各种致敏原均较敏感，兔无接触性致敏，但有较好的速发反应，大鼠和小鼠难发生接触性致敏，狗对两类变态反应均可发生。故两类试验均首选豚鼠，其次为兔、大鼠和狗等。

同一剂量可选用10个以上动物作实验。

表1 两类变态反应的特点

(2) 致敏原的制备： 实验用物质应尽量采用纯度最高的产品。用粉剂致敏效果不佳，需配成溶液。水溶性物质用生理盐水或蒸馏水稀释，脂溶性毒物可用丙酮、二甲基亚砜、乙醇作稀释剂。致敏原使用前常加入佐剂或蛋白质类结合物，以增加其抗原性。

(3) 致敏途径： 致敏途径应尽可能与生活中人体接触方式相符，可采用涂皮、皮内、皮下、腹腔注射以及吸入等。皮内和皮下注射以耳、足掌和背部皮肤多用，涂皮以背、颈和耳部皮肤多用。在研究空气污染物的致敏作用时，常采用吸入途径。

(4) 剂量选择和染毒时间： 化学物质的致敏作用虽不同于一般的毒性效应，但实验证明致敏作用也遵循着某种剂量一反应规律。致敏率和过敏反应强度与致敏原的剂量和作用时间有关。只有在体内或皮肤局部存在一定量的致敏原，经一定时间才能使机体出现致敏状态，此后再遇该物质时即可发生变态反应。但致敏原量过大如用中毒量反而可抑制变态反应过程，局部过分强烈的刺激，也可妨碍结果和正确判断。所以致敏剂量须作预备试验确定，一般选用不引起全身中毒和局部严重刺激的最大剂量作为最高剂量，并设2～3个低剂量。速发型实验的激发剂量可以用致敏剂量的3～10倍经静脉或腹腔注射。

染毒时间： 有一次法和重复法两种。重复法可每天一次或隔日一次，连续3～10次;或采用皮内或皮下注射一次，一周后再涂皮一次的混合法。激发试验一般在最后一次致敏染毒后1～4周进行。

(5) 反应结果的判定： 对迟发性反应实验，经皮处理时，局部反应在24～72h内出现明显的硬结及红斑为阳性反应，可根据激发试验后作用部位的肉眼观察所见判定，五级评分(见表2)。

对速发型反应的判定，主要应在激发注射后仔细观察其迅速出现的各种症状表现(见表3)。

根据上述实验动物最敏感组的阳性发生率(致敏率)，可将化学物质的致敏作用强度分为5级(见表4)。

近年来鉴于上述动物试验存在着若干缺点，如实验结

表2 局部反应强度评分标准

表3 速发型过敏反应强度分级

表4 化学物质致敏作用强度分级

果常受原发刺激的干扰，反应结果的评价多少带有一定的主观性，动物种属及个体差异很大等。因而提出了一些体外试验的方法，如淋巴母细胞转化试验，巨噬细胞移动抑制试验以及周围血细胞酶活性的测定等，都值得进一步研究。