鱼类毒性试验是利用鱼类作为试验对象，对水体中污染物进行毒性研究，目的在于探讨并阐明污染物对鱼类的影响及作用机理，防止水体污染物通过食物危害人体，为制订污染物在水体中的卫生标准提供依据。

(1)试验鱼： 不同的鱼种及个体对污染物的敏感性可能相差很大，试验鱼应同种、同龄，并要求健康、容易获得、经济、便于饲养及管理。试验鱼种可分为淡水鱼、海水鱼及欣赏鱼(金鱼)等数种。常用的淡水鱼有青、草、鲤、鲢、鳙鱼、河鲑等，它们生长速度快，鱼苗的季节性强，多用于短期试验。

选用淡水鱼时以体长5～8cm的鱼苗为宜，金鱼以2～4cm为宜;每组10尾左右，不得相差悬殊，最长鱼苗的体长(吻至尾根的长度)不能超过最小鱼苗体长的50%。

选好的试验鱼应在实验室内预先驯养7～10d，注意换水及保持水中的溶解氧不少于4～5mg/L; 驯养期间鱼在3～4d内的死亡率低于10%方可投入试验;试验前一天停饲。

(2)试验条件： 试验用水可用清洁的地面水或地下水，水的pH在7左右，水温在12～28℃。在同一试验中，水温的变动不宜超过±2℃。用淡水鱼做试验，要求水中溶解氧不低于5mg/L。

试验容器必需便于观察鱼的反应及清洗，不易吸附污染物而起化学反应，并有足够的容量。要求每2g鱼重所占的水容量至少1L，容器的上面加塑料纱罩，以免鱼跃出。

研究水体污染物的毒性，常需将污染物用清洁水配成不同浓度，配制时须注意这些物质在水中的溶解度、稳定性。对难溶的污染物加助溶剂或乳化剂助溶时，对照组亦应加入助溶剂或乳化剂。

污染物在水中的浓度，可根据它们在水中的最大溶解度或实际排入水体中的含量，通过预试，获得引起试验鱼全死或全不死的浓度，再进行正式试验。

(3)试验方法： ①急性毒性试验： 是判定高浓度污染物急性危害的一种方法，对研究一时性污染的危害具有重要意义，也是进行亚急性和慢性毒性研究的基础资料。通常以鱼类的行为、死亡作为观察指标，包括回避阈值、绝对致死浓度(LC₁₀₀)、半数耐受浓度(TLm)和最小致死浓度(MLC)等。②亚急性毒性试验： 试验期限2周至3个月，染毒剂量多为1/5～1/20TLm，目的在于阐明污染物较长期染毒下的毒作用特点、中毒症状及病理变化，并为慢性试验提供资料。③慢性毒性试验： 染毒剂量可为TLm值的1/20～1/10，000。研究期限常在3个月以上。有的从幼鱼开始，一直养至性成熟、产卵、孵化、至子代鱼苗90天为止，整个试验期历时10个月至一年以上。目的在于研究污染物在低浓度长期作用下对鱼类的毒性。

水体中的污染物达到一定浓度时可引起鱼类死亡，在判定污染物毒性时，常需测定它的致死浓度，包括绝对致死浓度、半数致死浓度及最小致死浓度。绝对致死浓度是引起试验鱼全部死亡的浓度; 半数致死浓度是使试验鱼50%死亡的浓度，亦称半数耐受浓度或半数存活浓度;最小致死浓度是引起试验鱼出现个别死亡的浓度。

根据TLm值可以对化学污染物的毒性进行分级。无条件进行慢性实验时，亦可根据TLm值来确定受试污染物在水中的安全限，即它在水中的最高容许浓度。根据污染物毒性的强弱，多采用96hTLm值的1/10～1/100作为该受试毒物在水中的最大容许浓度。

许多化学污染物对鱼的视觉、嗅觉、皮肤粘膜具有刺激作用，在水中达到一定浓度后，可引起试验鱼的回避反应。引起回避反应的剂量称回避阈值或嫌忌量，通常为TLm值的1/10～1/20。但有些污染物对鱼类不产生任何刺激，至死也不引起鱼类的回避。回避反应可用专门设计的回避试验槽测定。

许多化学污染物(如重金属、有机氟农药等)，在鱼体内能积蓄、富集、使本来不足以危害的浓度，因积蓄而对鱼类有害，或通过食物链对人造成危害，为此水体污染物的积蓄作用是鱼类毒性试验的重要内容。一般用96hTLm值的10-1、10-2、10^-2、或10-⁴来进行试验，随机取试验鱼检测鱼体内污染物的含量，研究其有无蓄积作用。根据污染物在鱼体内的浓缩倍数(污染物在鱼体内的含量/污染物在水中的浓度)将化学污染物的蓄积程度分为四级：浓缩倍数10～60为无积蓄，60～700为轻度积蓄，700～8000为中等积蓄，8000以上为高度积蓄。

在进行鱼类毒性试验时，有时也采用一些生理、生化及病理形态学方面的指标，如耗氧量、生长率、产卵率、孵化率、鱼苗存活率、畸形、转氨酶、乙酰胆碱酯酶、δ-氨基乙酰丙酸脱水酶等，可根据污染物的毒作用特性来选择各种观察指标，以判定它们的毒作用。